Coomassie
Z Wikipedie, otevřené encyklopedie
Comassie (nebo také Brilliant Blue,Brilliant Blue G, Acid Blue 90, C.I. 42655, Brilliant Blue G 250) je modré barvivo, používané převážně při elektroforéze na polyakrylamidovém gelu v přítomnosti dodecylsíranu sodného (SDS-PAGE). Gel se v barvivu namáčí třicet minut a potom se přes třicet minut promívá; výsledkem je nosič, který umožňuje dokázat přítomnost bílkovin. Podle polohy barvivem zviditelněné bílkoviny na polyakrylamidovém gelu se dá určit její molární hmotnost a tak analyzovat roztok různých bílkovin.
[editovat] Předpis pro laboratorní použití
- Barvící roztok
- 2.5 g Coomassie Brilliant Blue R, 455 ml methanolu, 455 ml deionizované / destilované vody, 90 ml ledové kyseliny octové
- Promívací roztok
- 455 ml methanolu, 455 ml deionizované / destilované vody, 90 ml ledové kyseliny octové
Coomassie je základní složkou pro výrobu činidla Brandfordové (Brandford reagent), používaném při kolorimetrickém stanovení bílkoviny v roztoku, v kyselém prostředí totiž fyzikální adsorbcí tvoří s proteiny (převážně s argininem) stabilní komplex s absorbancí mezi 465 nm a 595 nm; podle Lambert-Beerova zákona se tedy dá spočítat koncentrace bílkoviny.
- Činidlo Bradfordové
- 0.01% Coomassie Brilliant Blue G-250, 4.7% ethanol, 8.5% kyselina fosforečná; v deionizované / destilované vodě
[editovat] Jméno
Jako u mnoho jiných barviv vzniklo jméno Coomassie z afrického místopisu, v tomto případě z názvu městečka Kumasi v dnešní Ghaně. Sloužilo jako kyselé barvivo k barvení vlny, jméno mělo připomínat britskou okupaci Ašantska v Ghaně v roce 1896.1

