Barvení (biologie)
Z Wikipedie, otevřené encyklopedie
Barvení je biochemická metoda, kterou se přidá k substrátu specifická barvící látka (barvivo) a slouží v biologii na prokázání výskytu (kvalifikaci) nebo množství (kvantifikaci) specifické látky ve zkoumané tkáni nebo v pletivu, nebo k obarvení celých struktur a objektů, které zlepšuje nebo umožňuje jejich pozorování optickým mikroskopem.
Obsah |
[editovat] Barviva
abecedně:
- en: Bismarck brown
- karmín - barví jádra červeně, extrakt ze samiček červce nopálového (Coccus cacti), nepřebarvuje, dříve využíván v embryologických studiích pro barvení celých bloků tkání.
- en: Coomassie blue
- DAPI
- eosin
- en: Erie garnet = direct red 10
- etidium bromid
- fenolová červeň = phenol red
- hematoxylin
- en: Hoechst stains
- en: Iodine
- jádrová červeň = nuclear red = „Kerlechtrot“ - barví jádra červeně, v roztoku síranu hlinitého
- Kongo červeň = Congo red = direct red 28 - barví amyloid červeně
- krystalová violeť
- kyselina pikrová (2,4,6-trinitrofenol) - barví cytoplazmu buněk a svaly žlutě
- kyselý fuchsin - kolagenní vlákna červeně
- malachitová zeleň
- en: Methyl green
- en: Methylene blue
- neutrální červeň = Neutral red
- nilská modř
- en: Nile red = Nile blue oxazone - barví tukové kapénky červeně
- olejová červeň = oil red O - barví tuk červeně
- en: Rhodamine
- safranin
- saturnová červeň (sirius red F3B, direct red 80, F3B 200, C. I. No. 35780, CAS No. 2610-10-8) - azobarvivo, kolagenní vlákna červeně nebo barvení amyloidu
- sirius red 4B = direct red 79 = L4B 200 - azobarvivo
- šafrán - barví kolagen, extrakt z blizen šafránu setého
- Weigertův železitý hematoxylin = Weigert's Iron Hematoxylin - barví chromatin v jádrech šedě nebo temně hnědě (modročerně až hnědočerně)
[editovat] Barvicí metody
[editovat] Hematoxylin + eosin
[editovat] Barvení mukopolysacharidů (PAS + alciánová modř + hematoxylin)
- odparafínování: xylen 1 (5 min.), xylen 2 (5 min.), alkohol 1 (5 min.), alkohol 2 (5 min.), oplach v destilce
- kyselina jodistá 0,5 % 5 minut
- praní vodou 2-3 min, oplach destilovanou vodou
- Schiffovo reagens 20-30 min
- tekoucí voda 10 min., oplach destilovanou vodou
- alciánová modř (před použitím se doporučuje přefiltrovat) 1-2 hod.
- oplach vodou
- hematoxylin 5 min.
- praní 20 min., oplach destilovanou vodou, oplach absolutním alkoholem, xylen 3 (5 min.), xylen 4 (5 min.), montování
Výsledek:
- neutrální mukopolysacharidy a glykogen - červeně
- kyselé mukopolysacharidy - modrozeleně
- jádra - modře hematoxylinem
[editovat] Barvení kolageních vláken (saturnová červeň + Weigertův železitý hematoxylin)
- odparafínování: xylen 1 (5 min.), xylen 2 (5 min.), alkohol 1 (5 min.), alkohol 2 (5 min.)
- důkladně proprat ve vodě
- Weigertův železitý hematoxylin (roztok A + roztok B 1 : 1) 5 min. nebo gallocyanin 24 hod.
- praní v tekoucí vodě 5-10 min.
- saturnová červeň 1-20 min. (10 ml 1 % roztoku saturnové červeně + 90 ml nasyceného roztoku kys. pikrové)
- několikrát oplach v absolutním alkoholu, xylen 3, xylen 4, montování
Výsledek:
- kolagení vlákna - červeně
- svalovina - žlutě (pouze pokud je v saturnové červeni také kyselina pikrová)
- jádra - hematoxylinem
[editovat] Barvení elastických vláken (orcein + hematoxylin)
- odparafínování: xylen 1 (5 min.), xylen 2 (5 min.), alkohol 1 (5 min.), alkohol 2 (5 min.), oplach v destilované vodě
- orcein 6-8 hod. při teplotě 38-40 °C
- oplach destilovanou vodou
- oplach kyselým alkoholem 70 %
- praní ve vodě
- hematoxylin 5 min.
- praní 20 min., oplach destilovanou vodou, oplach absolutním alkoholem, xylen 3, xylen 4, montování
Výsledek:
- elastická vlákna - červenohnědě (elastické vazivo (žluté vazy obratlů, vazy hrtanu), elastická chrupavka (ušní boltec, epiglottis))
[editovat] Giemsovo barvení
[editovat] Gramovo barvení
[editovat] Externí odkazy
Metody:
- Metody histologického studia (PDF dokument)
- Odběr materiálu pro histologické vyšetření (textový dokument DOC)
Barviva:
- přehled barviv (anglicky)

