PĈR

El Vikipedio

Termociklilo por PĈR (PĈR-ilo)
Pligrandigu
Termociklilo por PĈR (PĈR-ilo)

PĈR ( polimeraza ĉen-reakcio) estas tekniko kiu ebligas amplifi envitre DNA-sinsekvojn per ripetado de plilongigaj reakcioj ĉeeste de specifaj nukleotidaj prajmiloj kaj de DNA-polimerazo. La malkovro de varmoŝatanta eŭbakterio Thermus aquaticus, kiu vivas en varmaj akvo-fontoj (70 ĝis 75°C) en la nacia usona parko Yellowstone, kaj la posta uzado de ties polimerazo, stabila ĝis temperaturoj proksimaj de 100°C, estas origino de la disvolviĝo de tiu tekniko.






[redaktu] Principo:

Etapoj de PĈR
Pligrandigu
Etapoj de PĈR

La envitra amplifa principo baziĝas je ripetado de 3 procezoj:

  • denaturo de ambaŭ DNA-fadenoj je alta temperaturo (ĉirkaŭ 95°C) por disigi DNA-fadenojn kaj ekhavi unufadenajn DNA-molekulojn.
  • prajmila komplementa hibridiĝo de unufadena celita DNA-sinsekvo (temperaturo tiam estas ŝanĝita al valoro inter 40°C kaj 65°C por ebligi bonan prajmil-fiksiĝon).
  • la plilongiga reakcio per termostabila DNA-polimerazo (la Tak-polimerazo) realiĝas je plejefika temperaturo je 72°C.

La produktaĵoj el tiu unua ciklo estas poste denaturitaj per varmo. Prajmiloj rehibridiĝas kun DNA-fadenoj devenintaj el la unua amplifa ciklo, ĉiu fadeno servas kiel matrico al la polimerazo. Je ĉiu ciklo, la kopi-nombro de la DNA-fragmento duobliĝas: 2n molekuloj haviĝas tiel post n cikloj, t.e. teorie ekzemple 1 048 576 molekuloj post 20 cikloj.

Tiu PĈR-tekniko tute revoluciis la esploradojn en molekula biologia kampo kaj aplikeblas multe tiel en klonado kaj studado de gen-esprimiĝo kiel en serĉado de genetikaj polimorfismoj.


Biologio
Ĉi tiu artikolo pri "PĈR" ankoraŭ estas ĝermo pri biologia temo. Vi povas helpi pluredakti ĝin post klako al la butono «redaktu».
Se jam ekzistas alilingva samtema artikolo pli disvolvita, traduku kaj aldonu el ĝi.



Komunejo
La Vikimedia Komunejo havas dosierojn rilatajn al